實(shí)驗(yàn)室用紫外分光光度計進(jìn)行物質(zhì)定性定量分析的核心設(shè)備，其波長準(zhǔn)確度（波長示值與真實(shí)值的偏差）與分辨率（區(qū)分相鄰吸收峰的能力）直接決定分析結(jié)果的準(zhǔn)確性——波長偏差會導(dǎo)致特征吸收峰定位錯誤，分辨率不足則無法識別復(fù)雜樣品中的重疊峰。定期開展兩項(xiàng)指標(biāo)的驗(yàn)證，是保障儀器性能穩(wěn)定、符合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)溯源要求的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

　　一、波長準(zhǔn)確度驗(yàn)證：校準(zhǔn)“光譜定位標(biāo)尺”

　　波長準(zhǔn)確度驗(yàn)證的核心是通過已知特征波長的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，對比儀器示值與標(biāo)準(zhǔn)值的偏差，確保波長示值精準(zhǔn)。

　　驗(yàn)證原理與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)選擇

　　利用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（如鐠釹濾光片、汞燈、氘燈）的特征吸收/發(fā)射波長作為“基準(zhǔn)標(biāo)尺”：鐠釹濾光片在紫外-可見區(qū)有多個特征吸收峰（如279.5nm、287.0nm、333.7nm），適用于200-800nm全波段驗(yàn)證；汞燈在253.7nm、365.0nm等波長有強(qiáng)發(fā)射峰，氘燈在486.0nm、656.1nm有特征發(fā)射峰，可作為特定波段的補(bǔ)充驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)室優(yōu)先選擇經(jīng)計量認(rèn)證的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，確保基準(zhǔn)值的可靠性。

　　操作步驟

　　實(shí)驗(yàn)室用紫外分光光度計預(yù)熱：開機(jī)預(yù)熱30分鐘，待光源（氘燈、鎢燈）穩(wěn)定后進(jìn)入驗(yàn)證模式；

　　基線校正：在驗(yàn)證波長范圍內(nèi)進(jìn)行基線掃描，消除背景干擾；

　　標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測試：將鐠釹濾光片放入樣品池，在200-800nm范圍內(nèi)以1nm的波長間隔掃描，記錄各特征吸收峰的儀器示值；若使用汞燈/氘燈，直接記錄儀器顯示的特征發(fā)射峰波長；

　　偏差計算：對比儀器示值與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特征波長標(biāo)準(zhǔn)值，計算絕對偏差（示值-標(biāo)準(zhǔn)值）與相對偏差。

　　判定標(biāo)準(zhǔn)

　　紫外區(qū)（200-400nm）絕對偏差需≤±1nm，可見區(qū)（400-800nm）絕對偏差需≤±2nm；若偏差超出范圍，需通過儀器自帶的波長校準(zhǔn)功能調(diào)整（如利用氘燈486.0nm峰進(jìn)行校準(zhǔn)），校準(zhǔn)后重新驗(yàn)證直至符合要求。

　　二、分辨率驗(yàn)證：檢驗(yàn)“光譜分辨能力”

　　分辨率驗(yàn)證主要針對儀器區(qū)分相鄰吸收峰的能力，通過測試具有已知峰間距的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，觀察儀器能否清晰分離相鄰峰。

　　驗(yàn)證原理與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)選擇

　　采用苯蒸氣或甲苯溶液作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：苯蒸氣在254nm附近有一組間距極小的吸收峰（峰間距約0.5nm），甲苯溶液在261.5nm、266.0nm處有相鄰吸收峰（峰間距約4.5nm），可分別驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室用紫外分光光度計的高分辨率與常規(guī)分辨率。也可使用萘的正己烷溶液（221.4nm、224.6nm峰，間距3.2nm），適配不同實(shí)驗(yàn)室的樣品類型。

　　操作步驟

　　樣品制備：配制濃度適宜的標(biāo)準(zhǔn)溶液（如0.05%苯的乙醇溶液、0.1%甲苯的正己烷溶液），確保吸收峰強(qiáng)度適中（吸光度0.3-0.8，避免峰飽和）；

　　掃描參數(shù)設(shè)置：設(shè)置波長間隔為0.1nm（高分辨率驗(yàn)證）或0.5nm（常規(guī)分辨率驗(yàn)證），掃描速度調(diào)至“慢”，確保數(shù)據(jù)采集充分；

　　掃描與峰識別：將標(biāo)準(zhǔn)溶液放入樣品池掃描，觀察相鄰特征峰的分離情況——若為苯蒸氣，需清晰識別253.0nm、254.6nm、256.2nm的三個獨(dú)立峰；若為甲苯溶液，需明確區(qū)分261.5nm與266.0nm峰，且兩峰間的谷值吸光度需≤兩峰峰值吸光度平均值的70%（即谷峰比≤0.7）。

　　判定標(biāo)準(zhǔn)

　　高分辨率（苯蒸氣）：能清晰分離254nm附近的三個相鄰峰，峰形對稱無重疊；

　　常規(guī)分辨率（甲苯/萘溶液）：相鄰峰的谷峰比≤0.7，且峰位示值偏差符合波長準(zhǔn)確度要求；

　　若無法滿足上述要求，需檢查儀器狹縫寬度（狹縫過寬會降低分辨率，通常調(diào)整為0.5-1nm）、光源強(qiáng)度（光源衰減會導(dǎo)致峰形平緩），必要時聯(lián)系廠家進(jìn)行光路校準(zhǔn)。
 

　　三、驗(yàn)證周期與注意事項(xiàng)

　　驗(yàn)證周期：日常使用的儀器每6個月驗(yàn)證一次；若儀器經(jīng)歷搬動、維修（如更換光源、單色器）或出現(xiàn)檢測數(shù)據(jù)異常（如特征峰偏移、峰形異常），需立即開展驗(yàn)證；

　　操作注意事項(xiàng)：驗(yàn)證過程中保持實(shí)驗(yàn)室溫度（20-25℃）、濕度（40%-60%）穩(wěn)定，避免溫濕度波動影響光路穩(wěn)定性；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)需在有效期內(nèi)使用，且掃描前確保樣品池潔凈無劃痕，防止光散射干擾；

　　記錄與溯源：詳細(xì)記錄驗(yàn)證日期、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)信息、儀器參數(shù)、測試結(jié)果與偏差，形成驗(yàn)證報告并存檔，確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可追溯，滿足CNAS等實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可規(guī)范要求。

　　波長準(zhǔn)確度與分辨率驗(yàn)證是實(shí)驗(yàn)室用紫外分光光度計日常維護(hù)的核心內(nèi)容。通過標(biāo)準(zhǔn)化的驗(yàn)證流程，既能及時發(fā)現(xiàn)儀器性能偏差，避免因設(shè)備問題導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差，又能為實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)的可靠性提供技術(shù)支撐，確保定性定量分析結(jié)果的準(zhǔn)確性與公信力。